生物学実験にキットを使用することが当たり前となった状況を受け,キットの種類や使用法など,実践的な知識の説明に力を入れた実践書,既刊「バイオ実験イラストレイテッド」シリーズを前提とし,随時参照する構成となっています.レッスン1(本書)では,技術の進歩を踏まえたうえでそれでも外せない必須の基本テクニックをまとめています.
【Contents】
第1章 実験ノートの作り方
1 必須な項目
2 書いておくと良い項目
第2章 実験の基本の試薬の調製
1 実験室での注意事項
2 実験器具の取り扱いと注意
3 試薬の調整
第3章 分子生物学実験の基本操作
1 酵素の取り扱い方
2 制限酵素によるDNAの切断
3 フェノール抽出
4 アルコール沈殿
5 DNAのアガロースゲル電気泳動
第4章 大腸菌の取り扱い
1 大腸菌を扱う際に必要な無菌操作
2 無菌操作の注意事項
3 シングルコロニーのピックアップから液体培養へ
4 液体培養からプレート線画培養(ストリーキング)へ
5 液体培養からフローズンストックの作製
6 フローズンストックからの培養
第5章 ゲノムDNAの調製
第6章 PCRの基本
1 一般的なPCR法
2 プライマー設計
3 ライブラリーからの遺伝子末端の増幅
4 PCR産物の精製
第7章ベクターとのライゲーション
1 ベクターの調製
2 ライゲーション反応の種類とインサートDNA末端の加工
第8章 形質転換からコロニーPCRまで
1 コンピテントセルの準備
2 コンピテントセルの形質転換
3 インサートチェックのためのコロニーPCRとマスタープレート
第9章 プラスミドプレップ
1 キットを使わないミニプレップ(アルカリ法)
2 キットを使ったミニプレップ
3 ミディプレップやマキシプレップなど
第10章 プラスミドDNAのシークエンシング
1 シークエンス反応
2 反応産物の精製
3 PRISM310の運転
4 終了したら
第11章 RNAの抽出
1 通常の細胞や動物組織からのRNA抽出
2 繊維質の組織からのRNA抽出
3 poly(A)RNAの精製
第12章 cDNAの合成と定性的RT-PCR
1 cDNAの合成(逆転写)
2 一般的なRT-PCR
3 5’RACEと3’RACE
付録 試薬の組成・調整法とマスターシート
1 いろいろな試薬の組成とその調整法
2 マスターシート
索引
著者略歴