DNA・RNA実験の基本と応用

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生命科学系(理学部・農学部・医学部・薬学部など)の学生・大学院生・研究者必携!DNA・RNA実験の基本とコツがすべてわかる!動画とイラストで、実験原理から手技のコツまで見えて理解できる!各実験の原理からコツ・細かな手順までまるっとわかる!この本と一緒に実験しよう!

【CONTENTS】
・動画
・ダウンロードできるプロトコル
・スマホでアクセスできる試薬調整時の自動濃度計算ツール


第1章 大腸菌とプラスミドを用いた実験の基本
 1. 大腸菌とプラスミド
 2. 菌体操作の基本
 3. 大腸菌の培養の準備
 4. 大腸菌の培養
 5. 大腸菌の形質転換
 6. 液体培養した大腸菌からのプラスミド抽出
 
第2章 逆転写
 1. 逆転写酵素とその種類
 2. polyA精製(オプショナル)
 3. 逆転写プロトコル
 4. 逆転写の際の注意点

第3章 遺伝子クローニング・配列改変とプラスミド構築
 1. プラスミドの改変についての概要
 2. TAクローニングの操作手順
 3. プライマーによる配列付加
 4. 制限酵素とライゲーションを用いたプラスミドの改変
 5. シームレスクローニング(Gibson法など)
 6. プラスミドへの変異の導入(制限酵素DpnIによる導入)
 7. オーバーラップエクステンションPCR(ふたつの断片をつなげるPCR)

第4章 PCRを利用した遺伝子クローニング技術の応用
 1. アダプター配列の付加による未知の配列のPCR増幅
 2. 3′RACE,5′RACEとその関連手法の技術的説明
 3. RACEにおける実際のプロトコル
 4. ゲノムウォーキング
 
第5章 リアルタイムPCR
 1. 原理(SYBR GreenRIを使用した場合)
 2. 定量・Cq 値・スタンダードと計算
 3. Cq値と定量の方法
 4. リアルタイムPCRのプライマー設計とプロトコル
 5. リアルタイムPCR装置を用いたジェノタイピング

第6章 次世代シーケンサー(超並列シーケンサー)
 1. 次世代シーケンスの種類と原理
 2. ショートリードシーケンサー(RNA-seqを例に)
 3. ショートリードシーケンサーにおけるRNAのクオリティ(RIN値)
 4. ロングリードシーケンサー
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