<続>化粧品技術者のための素材開発実験プロトコール集

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<続>化粧品技術者のための素材開発実験プロトコール集

正木仁 (監修)
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商品説明
大好評の前書刊行から約10年が経ち、最新知見・最新技術を反映し内容を大幅にアップデート。 非侵襲評価法・網羅的解析技術・動物実験代替法から、in vitro /ex vivo評価法まで収載した研究者・技術者必携の実践書。
目次
<総論>
第1章 最近の角層研究の動向
1 はじめに 角層の恒常性
2 プロテアーゼとpH
3 Corneocyte lipid envelope形成メカニズム
4 おわりに

第2章 最近の色素斑形成研究の動向
1 序論:色素斑研究の変遷
2 表皮-真皮クロストーク
 2.1 線維芽細胞によるパラクリン制御の破綻:Wntシグナルの変調
 2.2 基底膜の脆弱化
 2.3 血管新生
3 細胞老化と炎症:SASPと「炎症性老化」の影響
 3.1 シミ部位における老化細胞の蓄積とNF-κB経路
 3.2 SASPによる影響
4 細胞内ロジスティクス:輸送と分解のメカニズム
 4.1 メラノソーム輸送システム
 4.2 オートファジーとメラノファジーの機能低下
5 新たな外的・内的因子:ブルーライト,大気汚染物質,神経
 5.1 ブルーライトとOpsin 3シグナル
 5.2 大気汚染物質とAhR受容体
 5.3 神経系と「ストレス誘発性色素沈着」
6 結論:今後の展望

第3章 最近の皮膚老化研究における動向
1 はじめに
2 個体老化のホールマーク
3 皮膚の老化,見た目の変化
4 細胞老化
5 細胞老化と皮膚老化,見た目の変化との関連性
 5.1 老化細胞の皮膚での存在
 5.2 老化細胞の見た目の変化への作用
6 最近の抗老化の方向性 老化細胞の制御
 6.1 老化細胞の除去senolysis
 6.2 老化細胞の正常細胞への復帰
7 まとめ

第4章 初心者に役立つRNA-seq解析-得られたデータから何ができるのか?-
1 はじめに
 1.1 NGSで何がわかるのか
 1.2 スプライシング位置や定量
 1.3 変異頻度や位置の測定
2 RNA-seq
 2.1 RNA-seqとは?
 2.2 解析の方法
3 Rを用いた各種統計解析
 3.1 R環境のセットアップ
 3.2 Rに各種のアプリをダウンロードする
 3.3 統計解析
 3.4 heatmapを作る
 3.5 PCA分析(Principal Component Analysis:主成分分析)とプロット像の作成
 3.6 Volcano plotの作成 遺伝子のピックアップ

第5章 イメージング質量分析技術の皮膚への展開
1 はじめに
2 イメージング質量分析(Imaging Mass Spectrometry,IMS)
3 IMSの基本原理と測定フロー
4 ナノ微粒子支援型質量分析(Nano-PALDI)
5 IMSの応用事例
 5.1 食品の機能性成分のIMS(キャベツのスルフォラファン)
 5.2 角質・テープストリッピングのナノ微粒子支援型IMS
 5.3 毛髪のナノ微粒子支援型IMSと皮膚IMS
6 まとめ

第6章 化粧品・医薬部外品の安全性評価に資するためのガイダンスの留意点
1 はじめに
2 OECDで採用されている置き換え試験
3 置き換え試験とその利用上の留意点
 3.1 皮膚感作性評価
 3.2 眼刺激性評価
4 まとめ

<各論>
第1編 角層・表皮分化関連実験法
1 角層タンパク質定量法
2 SH基とSS結合の多重蛍光ラベル
3 角層細胞のデスモグレイン1(DSG1)の可視化 免疫染色
4 角層細胞タンパク質の官能基の蛍光ラベル 官能基の可視化
5 角層細胞の疎水性評価法
6 角層細胞コーニファイドエンベロープの成熟度の評価
7 2D培養表皮細胞,再生表皮モデルの分化マーカータンパク細胞免疫染色法
8 正常ヒト表皮角化細胞を用いた17型コラーゲンの検出法:ウエスタンブロット法と免疫蛍光染色法
9 表皮角化細胞が産生する基底膜構成成分Ⅳ型,Ⅶ型コラーゲン,ラミニン332の定量法
10 三次元培養表皮モデル中のセラミド分析法(LC/MS/MS法)
11 培養表皮細胞のタイトジャンクション関連タンパクの細胞免疫染色と機能測定法
12 培養表皮モデルを用いたTEWL計測方法(Tewitro)

第2編 抗炎症関連実験法
1 皮膚微弱炎症を反映する角層IL-1ra/IL-1α比の測定
2 過酸化スクワレンにより誘導される薄毛原因物質PGD2産生抑制作用の評価法

第3編 色素関連実験法
1 メラノソーム移送阻害評価法
2 色素細胞からのメラノソーム単離法
3 表皮細胞内におけるメラノソーム分解実験法
4 ヒト摘出皮膚と皮膚モデルの紫外線による黒化誘導

第4編 抗老化研究実験法
1 老化線維芽細胞の調製法(H2O2およびUVA)
2 老化細胞除去作用の評価(Senolysis)
3 コラーゲン取込受容体:Endo180産生促進作用の評価法
4 弾性線維形成と可視化法
5 Ⅰ型コラーゲン線維形成と可視化法
6 糖化処理した線維芽細胞におけるⅠ型コラーゲン産生低下を抑制する素材の評価法
7 摘出皮膚のⅠ型コラーゲン新生評価法

第5編 抗酸化関連実験法
1 細胞内活性酸素の測定法
2 細胞内抗酸化システムの増強作用の評価法Nrf2活性化から細胞内グルタチオンの定量
3 マロンジアルデヒド(MDA)を用いたタンパク質のカルボニル化とその定量法
4 角層細胞のAdvanced glycation end products(AGEs)染色法
5 タンパク質のニトロ化とその定量

第6編 心理的ストレス関連実験法
慢性ストレスモデルにおけるコルチゾール存在下のタイトジャンクション形成能評価

第7編 安全性関連新規代替法
Amino acid Derivative Reactivity Assay(ADRA)
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