遺伝子工学の原理

1章　生体成分の基礎知識
　1-1　核酸を構成する糖
　1-2　ヌクレオチドの構造
　1-3　アミノ酸
　　1-3-1　アミノ酸の性質
　　1-3-2　一次構造から四次構造まで
　　1-3-3　タンパク質工学の基本コンセプト
　1-4　膜脂質（生体成分の構造と物性）
　　1-4-1　リン脂質
　　1-4-2　糖脂質
　　1-4-3　コレステロール
　　1-4-4　その他の膜脂質
　1-5　その他の低分子物質
　　1-5-1　サイクリックAMP
　　1-5-2　ポリアミン
　　1-5-3　ATP，NAD+，NADP+，FAD，FMN
2章　基本単位の操作の原理
　2-1　電気泳動
　　2-1-1　核酸の電気泳動
　　2-1-2　タンパク質の電気泳動
　2-2　DNAの加工技術の原理
　　2-2-1　切断，連結と修飾
　　2-2-2　PCR技術とそれを利用したDNAの加工
　　2-2-3　遺伝子の構造解析
　　2-2-4　次世代シーケンサーに求められる技術
　2-3　各種ハイブリダイゼーション技術
　　2-3-1　サザン法
　　2-3-2　ノザン法
　　2-3-3　ウエスタン法（免疫的検出法）
　2-4　生命科学実験におけるクロマトグラフィー技術
　　2-4-1　イオン交換法
　　2-4-2　ゲルろ過法
　　2-4-3　疎水法
　　2-4-4　アフィニティー法
　　2-4-5　その他のクロマトグラフィー法
3章　微生物の遺伝子操作技術
　3-1　細菌を利用する遺伝子操作技術
　　3-1-1　宿主ベクター系について
　　3-1-2　プラスミドベクターを用いたクローニング
　　3-1-3　バクテリオファージ（ファージ）を用いたクローニング
　3-2　真核微生物（酵母）の遺伝子操作
　　3-2-1　酵母のプラスミドベクター系
　　3-2-2　PCR法を用いた酵母遺伝子の破壊およびエピトープタギング法
4章　植物の遺伝子操作技術
　4-1　カルスとプロトプラストの利用
　4-2　遺伝子の導入
　　4-2-1　アグロバクテリウムを利用する形質転換
　　4-2-2　パーティクルガンの利用
　　4-2-3　エレクトロポレーション法
　　4-2-4　ガラスビーズ法
5章　動物細胞と多能性幹細胞の利用
　5-1　細胞工学的操作
　　5-1-1　モノクローナル抗体の作製
　　5-1-2　リポフェクション法
　　5-1-3　ウイルスを使った遺伝子導入法
　5-2　多能性幹細胞の樹立とその特性
　　5-2-1　多能性幹細胞樹立の歴史
　　5-2-2　マウスES細胞（胚性幹細胞）の樹立とその特性
　　5-2-3　EG細胞（胚性生殖細胞）の樹立とその特性
　　5-2-4　胚性幹細胞のゆらぎ
　5-3　ノックアウトマウスの作製
　　5-3-1　ES細胞における相同組換えを利用した遺伝子ターゲティング
　　5-3-2　ターゲティングベクターの構築
　　5-3-3　ES細胞の生殖系列の寄与
6章　遺伝子発現の網羅的解析技術
　6-1　転写動態の解析（トランスクリプトーム解析）
　　6-1-1　マイクロアレイ法
　　6-1-2　サブトラクション法
　　6-1-3　ディファレンシャルディスプレイ（DD）法
　　6-1-4　cDNA-AFLP法
　　6-1-5　HICEP法
　　6-1-6　SAGE法
　6-2　タンパク質発現動態の解析（プロテオーム解析）
　　6-2-1　二次元電気泳動を利用する方法
　　6-2-2　質量分析計を利用する方法
　　6-2-3　ファージディスプレイ法
7章　遺伝子発現を解析する技術
　7-1　遺伝子発現の解析
　　7-1-1　RT-PCR法
　　7-1-2　リアルタイムPCR法
　　7-1-3　レポーターアッセイ法
　7-2　タンパク質・遺伝子相互作用
　　7-2-1　ゲルシフト法
　　7-2-2　フットプリント法
　　7-2-3　クロマチン免疫沈降法
　　7-2-4　ChIP-on-chip法
　　7-2-5　ワンハイブリッド法
　7-3　タンパク質-タンパク質相互作用
　　7-3-1　免疫沈降法
　　7-3-2　ツーハイブリッド法
　　7-3-3　表面プラズモン共鳴を利用した方法
　7-4　標識技術を利用した細胞内での分子観察法
　　7-4-1　BiFC法
　　7-4-2　in situ ハイブリダイゼーション（in situ hybridization）法
　　7-4-3　免疫染色法
　　7-4-4　FRET（Fluorescence Resonance Energy Transfer）法
8章　遺伝子のノックダウン技術
　8-1　RNAi法，アンチセンス法，MO法
　　8-1-1　RNAi法
　　8-1-2　アンチセンスRNA法
　　8-1-3　モルフォリノアンチセンスオリゴ（MO）法
　8-2　tsデグロン法
9章　遺伝子産物の高発現
　9-1　微生物を利用する方法
　　9-1-1　発現ベクターおよび宿主の選択
　　9-1-2　外来遺伝子の転写段階での制御
　　9-1-3　外来遺伝子の翻訳段階での制御
　　9-1-4　外来遺伝子産物の回収技術
　　9-1-5　プロテアーゼ活性の阻害
　　9-1-6　分泌技術
　　9-1-7　融合化による回収技術
　9-2　昆虫の培養細胞を利用する方法
　　9-2-1　バキュロウイルス
　　9-2-2　宿主昆虫細胞
　　9-2-3　組換え型バキュロウイルスの調製とタンパク質の発現
　9-3　in vitro 無細胞発現法
　　9-3-1　S30画分を用いた無細胞翻訳系
　　9-3-2　ウナギの網状赤血球系
　　9-3-3　コムギを用いた無細胞翻訳系
　　9-3-4　PUREシステム
　　9-3-5　フォールディングシステムについて
　　9-3-6　無細胞翻訳系の利点
カラー参照図
索引